Каталог статей

Испытание иммунитета к вирусу Рауса

Испытание иммунитета к вирусу Рауса проводилось через 3 недели после окончания вакцинации. С этой целью 4 подопытным и 4 контрольным (свежим) курам внутрикожно инокулиро-вали бесклеточную надосадочную жидкость опухолевого экстракта, содержащую вирус в разведении 10~—10"'. Результаты этих опытов, представленные в табл. 35, свидетельствуют о том, что у иммунизированных формол-вакциной кур опухоли возникли только в ответ на введение максимальной дозы вируса (разведение экстракта 10~). Однако даже в этом случае опухолевый рост наблюдался только у 2 из 4 подопытных кур.

В то же время у всех контрольных кур, привитых одновременно с подопытными, опухоли появились при введении надосадочной жидкости в разведении 10~, 10~и 10~. Результаты этого опыта свидетельствуют о том, что инокуляция опухолевого экстракта, в котором вирус инактивирован формалином, вызывает у кур иммунитет к последующему введению биологически активного вируса.

Для испытания иммунитета к опухолевым клеточным антигенам 4 иммунизированных и 4 контрольных кур одновременно прививали опухолевой суспензией, содержащей 3Х10— — Зх10 клеток. Полученные результаты свидетельствуют о том, что при вакцинации кур формол-вакциной у них не удается воспроизвести иммунитет к опухолевым клеточным антигенам: иммунизированные куры оказываются восприимчивыми к опухолевым клеткам в такой же степени, как свежие, контрольные. Таким образом, вакцинация кур экстрактом, в котором вирус Рауса был инактивирован формалином, оказалась эффективной в отношении создания противовирусного иммунитета и неэффективной для воспроизведения резистентности к клеточным антигенам. Эти результаты находятся в соответствии с приведенными выше данными 3. Л. Байдаковой и Р. М. Радзиховской {1 }, а также с опытами Habel {5}, показавшего невозможность воспроизведения резистентности к клеточным антигенам полиомной опухоли с помощью вируса полиомы, инактивированного ультрафиолетовыми лучами.

Убедившись в том, что введение инактивированного вируса не вызывает иммунитета к клеточному антигену, мы попытались воспроизвести такой иммунитет путем инокуляции курам биологически активного вируса Рауса. Задача эта была связана с большими трудностями: в противоположность опытам с вирусами полиомы, SV-40 и мышиных лейкозов, к которым мыши и хомяки невосприимчивы во взрослом состоянии, куры сохраняют чувствительность к вирусу Рауса в любом возрасте. Поэтому вакцинацию надо было начинать с очень малых «подпороговых» доз вируса, не вызывающих опухоли у кур в предварительном опыте титрования. Экстракт саркомы Рауса, приготовленный на 0,2 М цитратно-фосфатном буфере с рН = 7,3, двукратно центрифугировали при 5000 об/мин. Надосадочную жидкость разливали по 1 мл в ампулы и после замораживания в смеси ацетона и сухого льда хранили в контейнере с сухим льдом. Содержимое одной ампулы титровали на 2 свежих курах. После определения титра вируса куры были вакцинированы надосадочной жидкостью. Вакцинация состояла из 6 инъекций с интервалами 5—6 дней. Для каждой вакцинации использовали новую ампулу, содержимое которой разводили буферным раствором и вводили подопытным курам внутрикожно в 6 различных точек одновременно по 0,2 мл в каждую.

Вакцинация, как указывалось выше, начиналась с «подпороговых» доз и с каждой последующей инъекцией доза вируса увеличивалась. Титр вируса был равен 10~. Курам последовательно вводили надосадочную жидкость в разведениях 1хЮ~, 5х10", 5х10", 1 X 10~ и 1 X 10~. Одновременно с последней инъекцией вируса содержимое той же ампулы в нисходящих разведениях вводили свежим курам для повторной проверки титра вируса. Оказалось, что 2-месячное хранение вируса в контейнере с сухим льдом сопровождалось резким падением активности вируса (титр снижался с 10~ до 10"), что было связано с колебанием температуры в контейнере.

Медицинские советы Марии Струбциновой